*608625 PEPTIDYL-tRNA HYDROLASE 2; PTRH2
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=608625


BCL2 INHIBITOR OF TRANSCRIPTION 1; BIT1

Gene map locus 17q23.1

CLONAGEM

A perda de ligação à matriz extracelular causa a apoptose, um processo conhecido como anoikis. A BCL2 é uma proteína anti-apoptótica que pode proteger as células contra a anoikis. Jan e outros (2004) procuraram por proteínas envolvidas na regulação dependente da adesão celular na anoikis por expressão de um clone para reguladores de BCL2 dependentes da integrina. Eles identificaram BIT1, o qual codifica uma proteína prevista em 179 aminoácidos com uma massa molecular calculada em 27 quilo-dáltons. BIT1 está evolucionariamente conservada da bactéria ao ser humano. Ela contém uma seqüência de localização mitocondrial no terminal N e um domínio de UPF0099 no terminal C. Análises de Northern blot detectaram um transcrito BIT1 de 1 quilodálton expressado proeminentemente nos testículos, próstata, músculo esquelético e fígado, com expressão mais baixa no coração, baço, placenta e cólon. Nenuma expressão significativa foi detectada no timo ou nos leucócitos periféricos. As células humanas dos rins demonstraram somente um traço da expressão de BIT1. A imuno-pigmentação localizou o BIT1 endógeno nas mitocôndrias de céluas HeLa, e análises de imuno-borrão revelaram uma doublet (cópia falsa) de 20 quilo-dáltons nos extratos mitocondriais de células HeLa.

FUNÇÃO DO GENE

Jan e outros (204) mostraram que a BIT1 mitocondrial é liberada no citoplasma durante a apoptse. A BIT1 citoplasmática formou um complexo com AES (600188 – Amino-Terminal Enhancer of Split; Terminal amina intensificador de divisão) e induziu a morte celular com características de apoptose independente de caspase. A ligação celular a fibronectina (135600) neutralizou o efeito apoptótico de BIT1 e AES. O aumento da expressão de BIT1 aumentou a anoikis, enquanto a expressão suprimida a reduziu.

MAPEAMENTO

O Consórcio Internacional de Mapeamento por Radiação Híbrida mapeou o gene PRRH2 no cromossomo 17.

MODELO ANIMAL

Kairouz-Wahabe e outros (2008) atestaram que camundongos nulos para BIT1 nasceram vivos, mas faleceram dentro das duas primeiras semanas de uma síndrome da cria pequena com fraqueza muscular, ataxia (incapacidade de coordenar o movimento muscular, causada com mais freqüência por distúrbios no cérebro ou na medula espinhal;dic.Stedman) e peso diminuído. Fibroblastos embrionários do camundongo cultivados (MEFs) de embriões nulos para Bit-1 foram mais resistentes à morte celular induzida por anoikis do que células de camundongos de tipo selvagem ou ninhadas heterozigotas. Os MEFs (fibroblastos embrionários do camundongo) e os tecidos de camundongos nulos pra Bit-1 exibiram um aumento marcado na fosforilação de ERK (veja ERK2; omim 176948). A expressão derrubada de BIT1 nas células HeLa resultou no aumento da ativação de ERK, e a derrubada parcial de ERK2 reverteu o aumento da resistência aumentada à anoikis dos BIT1 derrubados.

{Obs.: ERK2 é MAPK1: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/dispomim.cgi?id=176948

ERKs também são conhecidas como proteínas quinases ativadas por mitógeno ou maturação (MAP). Cobb e outros (1991) providenciaram uma revisão. Thomas (1992) deu uma revisada nas quinases MAP e Seger e Krebs (1995) revisaram a cascata de sinalização da quinase MAP.
A quinase MAP ERK2 é amplamente envolvida na transdução de sinal eucariótico. Na ativação, ela se transloca para o núcleo de células estimuladas, onde fosforila alvos nucleares. Khokhlatchev e outros (1998) descobriram que a acumulação nuclear de EPK2 micro-injetada depende de seu estado de fosforilação mais do que de sua atividade ou de componentes a montante de sua via de sinalização. A EPK2 fosforilada forma dímeros com parceiros de ERK2 fosforilados ou não fosforilados. A rupura da dimerização por mutação de ERK2 reduz sua habilidade para acumular-se no núcleo, sugerindo que a dimerização é essencial para sua relocalização normal dependente de ligante. Outros membros da família de quinase MAP também formam dímeros. Khokhlatchev e outros (1998) concluíram que a dimerização é parte do mecanismo de ação da família de quinases MAP.

As viroses influenza A são causas significativas de morbidade e mortalidade no mundo. Vacinas anualmente atualizadas podem prevenir a doença, e anti-virais são tratamento efetivo no começo da doença, quando os sintomas são freqüentemente não-específicos. A replicação viral é sustentada por eventos de sinalização intracelular. Usando U01260, um inibidor de MEK1 (omim: 176872) e MEK2 (omim: 601263), e dessa maneira uma via inibidora de RAF1 (omim 164760)/MEK/ERK (veja Favata e outros (1998)), Pleschka e outros (2001) examinaram a resposta celular para a infecção com influenzaA. U01260 suprimiu ambas as fases de ativação inicial e tardia de ERK após a infecção pelo vírus. A inibição da via de sinalização ocorreu sem diminuição da síntese do RNA viral ou de proteína viral, ou da importação dos complexos ribonucleoproteicos (RNP) virais para o núcleo. Não obstante, U01260 inibiu a sinalização RAF/MEK/ERK e a exportação do RNP viral sem afetar a via de exportação de mRNA celular . Pleschka e outros (2001) propuseram que ER regula um fator celular envolvido na função de exportação nuclear de proteína viral. Eles sugeriram que a aplicação local de inibidores de MEK podem ter efeitos tóxicos somente menores no hospedeiro enquanto inibe a replicação sem dar razão a variantes virais resistentes a drogas.

A toxina letal (LT) do antraz (causada pelo Bacillus anthracis), um fator de virulência crítica do Bacillus anthraxis), é um complexo de fator letal (LF) e antígeno protetor (PA). O PA liga-se ao receptor do antraz (ATR; omim 606410) para facilitar a entrada do fator letal dentro das células. A toxina letal rompe a via de sinalização de MAPK nos macrófagos (Park e outros, 2002). Agrawal e outros (2003) mostraram que, no camundongo, as toxinas letais diminuem a função das células dendríticas (DCs), inibindo a sobre-regulação de moléculas co-estimulatórias, tais como CD40, CD80, e CD86, assim como a secreção de citocina, em resposta à estimulação de lipopolissacarídeos. DCs expostas à toxina letal falharam em estimular células T e B antígeno-específicas in vivo, resultando em significantes reduções do anticorpo IgG circulante. Análises de Western blot indicaram que o fator letal diminui severamente a fosforilação de p38, ERK1 e ERK2. Um cocktail de inibidores de MAPK sintético inibiu a produção da citocina de maneira similar àquela do fator letal. Usando uma forma mutante de fator letal sem o sítio catalítico necessário para a clivagem de MEK1, MEK2 e MEK3 (omim 602314), os ativadores a montante de ERK1, ERK2, e p38, respectivamente, Agrawal e outros (2003) descobriram que a clivagem desses MEKs é essencial para a supressão da função das células dendríticas. Eles propuseram que esse mecanismo pode operar no início da infecção, quando os níveis da toxina letal são baixos, para diminuir a imunidade. Na infecção mais avançada, Agrawal e outros (2003) notaram que a LT (toxina letal) deve ter efeitos inflamatórios bastante diferentes.}